流式细胞术(FCM)是利用流式细胞仪对快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒等进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析或分选的技术,在流式细胞仪中,根据接受到的信号的强弱反映不同细胞的物理学特征从而可以对每个细胞进行多参数定量分析[1]。在临床上,流式细胞术已经成为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)检测的金标准。另外,这项技术也已经广泛应用于生物医学研究(如免疫学、肿瘤学和细胞生物学等)和临床诊断中(疾病诊断、疗效评估和新药开发等)。
首先可用于细胞表面标记、功能分析。在免疫学中,FCM可以进行淋巴细胞亚群分析,可以一些淋巴细胞的比例,比如判断CD4+/CD8+比例,用于检测免疫状态[1]。因此,这一技术对于人体细胞免疫功能的评估、其他免疫功能性疾病的分析以及各种血液病有重要作用。
其次是肿瘤标志物检测与分类。FCM探测那些处于正常细胞向癌细胞转化的量变阶段、尚未达到质变的细胞。还可根据化疗过程中肿瘤DNA分布直方图的变化直接地看到肿瘤细胞的杀伤变化,及时选用有效的药物,设计最佳的治疗方案[2]。
在其他方面,流式细胞术有助于研究干细胞的生物学特性、分化潜力以及用于再生医学的潜力。有研究发现流式细胞术能够进行微生物群体的计数、识别和功能分析,有助于环境监测、食品安全和抗生素研究[3]。在临床诊断方面,流式细胞术在血液学中被用来分析血液样本中的各种细胞,如红细胞、白细胞和血小板。它可以用于诊断血液疾病,如白血病、贫血和血小板功能障碍[4]。其次在药物筛选与开发、基因工程与转基因研究等方面也有一定影响。
1.PNH的诊断
CD55和CD59缺乏检测:PNH是一种罕见但严重的获得性血液疾病,PNH患者的红细胞和白细胞表面通常缺乏CD55和CD59两种膜蛋白,这两种蛋白对于控制补体系统在细胞表面的活性至关重要。流式细胞术可以通过分析这两种蛋白的表达情况,来诊断是否存在PNH[5]。
流式细胞术可以帮助确定克隆细胞的百分比,即血液中存在的CD55和CD59表达缺失细胞的比例,可以分为:
①经典型PNH亚型,这是最常见的类型,指在CD55和CD59表达上都有缺失的克隆细胞存在。这些细胞对补体系统高度敏感,易发生溶血。
②非经典型PNH亚型,这类亚型中,细胞可能只缺乏CD55或CD59中的一种,而另一种蛋白仍然正常表达。虽然不如经典型PNH那样易发生严重溶血,但仍可能在特定条件下引发溶血性贫血。
③混合型PNH亚型,在某些情况下,患者可能同时存在经典型和非经典型PNH的特征,即不同克隆细胞在CD55和CD59表达上的组合存在。
治疗前后的变化监测:流式细胞术可以定期监测患者血液中CD55和CD59表达缺失细胞的变化,以评估治疗的有效性和病情的演变。治疗后,如果克隆细胞百分比减少,则通常表示治疗有效[6]。
流式细胞术可以帮助鉴别PNH与其他血液病的区别,尤其是在一些临床表现相似的情况下,如自身免疫性溶血性贫血等[7]。
流式细胞术作为一种高度精确的细胞分析技术,在免疫学、癌症学和遗传学等多个领域有着广泛的应用。特别是在PNH的诊断中,其高灵敏度和特异性使其成为关键的辅助诊断工具,为患者的早期诊断与治疗提供了重要支持。
[1]冯睿婷,赵继智.肺结核患者血清T淋巴细胞亚群检测流式细胞术的应用[J].内蒙古医学杂志,2020,52(10):1190-1191.
[2]申泉,张丽,朱镭.流式细胞术的应用及发展[J].临床医药实践,2004,13(2):83-85.
[3]严心涛,王策,裴智果,等.快速定量检测细菌的FCM系统研制及性能评估[J].光学精密工程,2019,27(6):1245-1254.
[4]王福超.探究流式细胞术(FCM)用于白血病外周血细胞检验对急性白血病(AL)预后的评估价值[J].世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊),2020,20(42):153,155.
[5]郜俪薇.流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨[J].实用糖尿病杂志,2019,15(05):32-33.
[6]谢亚荣,任方刚,张娜,等.CD55 CD59检测在阵发性睡眠性血红白尿诊断中的意义[J].中国药物与临床,2016,16(5):756-758.
[7]钟明华,马亮,廖军鲜,等.自身免疫性溶血性贫血红细胞抗体免疫分型与溶血程度的关系[J].中日友好医院学报,2006,20(2):85-87.
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